НАЦІОНАЛЬНА МЕДИЧНА АКАДЕМІЯ післядипломної освіти імені П.Л.ШУПИКА

Дослідницька діяльність





ДОСЛІДНИЦЬКА ДІЯЛЬНІСТЬ

Центральна науково-дослідна лабораторія (ЦНДЛ)

 Національної медичної академії післядипломної освіти

імені П.Л.Шупика

 

Центральна науково-дослідна лабораторія (надалі - ЦНДЛ) є окремим структурним підрозділом Національної медичної академії післядипломної освіти імені П.Л. Шупика і підпорядковується ректору Академії та проректору з наукової роботи.

 

ІСТОРІЯ

ЦНДЛ створена в 1972р. згідно з Постановою Державного комітету по науці і техніці при Раді Міністрів СРСР та наказом МОЗ СРСР під керівництвом професора В.Т.Антоненка.

У ході виконання наукових досліджень ЦНДЛ НМАПО імені П.Л.Шупика співпрацює з різними науково-дослідними інститутами, а саме:НДІ Національної академії медичних наук України (НАМНУ) та Національної академії наук України (НАНУ), Національним медичним університетом імені О.О.Богомольця. Окрім наукової діяльності співробітники ЦНДЛ постійно надають методичну та консультативну допомогу пошукачам та аспірантам кафедр академії та інших закладів в плануванні та виконанні дисертаційних робіт.

Згідно наказу МОЗ України за № 135 від 8.06.2000 р. ЦНДЛ у 2010 році пройшла акредитацію на право проведення клінічних досліджень з імунології, біохімії та генетики .

 

СПІВРОБІТНИКИ ЦНДЛ:

Керівник: - Ігрунова Ксенія Миколаївна, доктор медичних наук.

Штатний розпис ЦНДЛ

 

Науковий ступінь

К-сть

1.    

Провідних наукових співробітників

1

2.    

Старших наукових співробітників

3

3.    

Наукових співробітників

4

4.    

Молодших наукових співробітників

3

5.    

Провідний інженер

2

6.    

Старший лаборант І категорії

-

7.    

Лаборант ІІІ категорії

2

8.    

Робітник по догляду за тваринами

2

З них                                           д.м.н.                                                                    1

                                                     к.м.н.                                                                     2

                                                     к.б.н.                                                                     1

Загальна кількість штатних посад                                              18,5

 

НАПРЯМКИ ДІЯЛЬНОСТІ

Сьогодні в лабораторії проводяться фундаментальні та прикладні дослідження на рівні стандартів світової медицини:

·          Вивчення регуляторної ролі імунної системи;

·          Вивчення механізмів апоптозу;

·          Вивчення механізмів гіпертрофії та проліферації;

·          Вивчення генетичних детермінант розвитку патології;

·          Вивчення ролі інфекційних агентів та цитокінів у розвитку серцево-судинної патології;

·          Вивчення патогенезу стресових реакцій;

·          Визначення (індивідуально) ролі епігенетичної регуляції у розвитку патології;

·          Роль всіх вище зазначених факторів у розвитку критичних станів;

 

На базі фундаментальних досліджень вирішуються питання прикладного призначення для використання в практиці охорони здоров’я. Так, в ЦНДЛ запропоновано оригінальний діагностичний алгоритм для виявлення груп ризику в кардіологічній клініці за визначенням індексу апоптозу клітин серцево-судинної системи. Запропоновано нові методи індивідуального підбору in vitro фармацевтичних засобів для оптимізації лікування пацієнтів. Розробляються методи визначення ступеню ризику та протекції стресогенної патогенетично-спрямованої патології.

 


АПАРАТУРА

 

Проточний цитофлюриметр PAS Partec

З 2004 року в лабораторії працює проточний цитофлюриметр. Цей прилад має повний пакет програмного забезпечення для проведення цитологічних досліджень, аналізу субпопуляції лімфоцитів (імунофенотипування), аналізу ДНК (клітинного циклу, плоїдності, апоптозу). Визначення плоїдності проходить шляхом визначення ДНК кожного ядра, зі швидкістю в кілька тисяч за секунду. Результат відображається у вигляді гістограми ДНК в реальному часі на великому світло-діодному екрані разом з рівнем плоїдності.

Старший науковий співробітник, к.б.н. Ватліцов Д.В, який працює на ньому, пройшов стажування у Німеччині на заводі по їх виробництву. За 2011 рік ним було проведено понад 3000 досліджень.

Паралельно лабораторія обладнана механічним дезагрегометром солідних тканин, що дає можливість виконувати цитологічні та біохімічні дослідження на проточному аналізаторі.

 

Автоматичний біохімічний і ІФ аналізатор Labline-100

Новітня автоматизована повністю відкрита система, що не потребує залучення додаткового персоналу та використання специфічних реагентів для виконання повного спектру біохімічних (ензими, субстрати, ліпіди, електроліти, латексна та імунотурбодіметрія білків сироватки), імуноферментних (при інфекційних захворюваннях, пухлинні маркери, гормони щитовидної залози та антитіла, гормони репродуктивних та ендокринних органів, імуноглобуліни, антитіла при системних та аутоімунних та захворюваннях) аналізів, з визначення онкомаркерів, наркотичних препаратів та ліків, функції фертильності. На ньому працюють ст.н.с. Ватліцов Д.В. та м.н.с. Олешко Ю.М. Додаткова інформація: http://biotechlab-s.com/ , http://www.diaveritas.com.ua/ , http://diameb.ua/ , http://terra-med.com.ua/ , http://www.vector-best.ru/

 

Аналізатор агрегації тромбоцитів АР 2110

Аналізатор агрегації тромбоцитів використовується для вивчення тромбоцитів in vitro, їх агрегаційних властивостей турбідиметричним методом: шляхом безперервного вимірювання змін коефіцієнту світлопропускання, що проходить в змішуваній та термостатуємій суспензії клітин, з виводом результатів на встроєний індикатор чи комп"ютер. Апарат дозволяє проводити послідовні дослідження в одному каналі з різними індукторами агрегації тромбоцитів: АДФ, колаген, ристоміцин, адреналін. Область використання:

·        АДФ-індукована агрегація (діагностика геморагічного синдрому, претромботичних та тромботичних станів, вроджених тромбоцитопатій);

·        діагностика спадкових/вроджених аномалій тромбоцитів (вроджених тромбоцитопатій: хворіб Віллебранда, Бернара-Сульє, тощо);

·        діагностика набутої патології тромбоцитів гіпо- та гіперагрегаційного характеру (діагностика лейкозів, уремії, захворювань печінки, ДВЗ-синдрому);

·        оцінка антиагрегаційної ефективності фармакологічних препаратів,

·        Підбір/контроль адекватної анти-агрегантної терапії,

·        оцінка життєздатності тромбоцитарної маси при переливанні крові.

На аналізаторі працює м.н.с. Олешко Ю.М.

 

Напівавтоматичний біохімічний аналізатор METROLAB 1600DR

Аналізатор (фотометр) зі стандартною та проточною кюветами використовується для зміни оптичної щільності по наступних показниках: кінцева точка, фіксований час реакції, кінетика, абсорбція, час коагуляції, а також для проведення досліджень крові – що успішно виконує н.с. ЦНДЛ Лисенко О.В.

 

Спектрофотометр СФ-46

Методики дослідження, які неможливо виконувати на біохімічних аналізаторах, виконуються на СФ-46: використовується для вимірювання змін спектральних коефіцієнтів пропускання рідких та твердих речовин в ділянці спектру від 190 до 1100 нм. Визначає концентрацію та швидкість змін оптичної щільності. В минулому (2011) році науковим співробітником ЦНДЛ НМАПО імені П.Л.Шупика Аніщуком М.Г. на ньому було зроблено 1310 досліджень.

 

Мікроскопія

Наявний люмінесцентний мікроскоп ЛЮМАМ + МБІ-1 дозволяє проводити спостереження за міченими флюорохромами та моноклональними антитілами. Мікроскоп МБІ-11 дозволяє отримувати зображення матеріалу в прохідному, відбитому та комбінованому освітленні (кількість, форма, рухливість (на термостатичному столику)), а встановлена на ньому цифрова фотокамера з високою розподільною здатністю дозволяє робити цифрові фотографії гістологічних препаратів (зображень) зі збереженням та обробкою на комп"ютері. На мікроскопах працюють н.с. Павлюк В.Д., м.н.с. Аніщук М.Г.

 

Цитогенетичний аналіз

Одним з сучасних методів дослідження геному є цитогенетичний та молекулярно-цитогенетичний аналіз. Впровадження новітніх методів діагностики: таких як флуоресцентна (in situ) гібридизація (FISH), дозволяє діагностувати 99% всієї хромосомної патології, в тому числі і на інтерфазних ядрах. FISH-метод є на сьогодні пріоритетним напрямком діагностики у всьому світі. Методи застосовуються для діагностики хромосомної патології у дітей з вродженими вадами розвитку, для виявлення причин порушення репродуктивної функції у подружніх пар та під час проведення пренатальної діагностики.

 

ПЛР

Метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) відкрив нові можливості для клінічної лабораторної діагностики – детекція генетичних мутацій та виявлення ДНК або РНК інфекційних агентів в периферичній крові, сироватці, плазмі, сечі, спермі, секреті простати, зішкрябах та мазках (цервікальних, вагінальних, уретральних), слині, змивах, бронхоальвеолярному лаважі, мокроті, спино-мозковій рідині, суглобовій рідині, сльозній рідині, грудному молоці, виділеннях з молочних залоз, біоптатах, аутопсійному матеріалі та ін. Використання новітніх технологій дозволяє провести аналіз в дуже короткий термін – практично на протязі одного робочого дня, що має важливе значення при виборі стратегії лікування.

 

Визначення цитокінів

Дослідження є важливим для оцінки факторів неспецифічної резистентності організму. Дослідження проводять мікрометодом, в культурах чутливих клітин (in vitro), а саме: визначають здатність клітин крові до продукції альфа- та гама- інтерферонів під впливом специфічних індукторів, титр інтерферону в сироватці крові, наявність індукованого, спонтанного фактору некрозу пухлин (ФНП, TNF) та ФНП в сироватці крові. При наявності тест-систем для ІФА проводять визначення названих вище цитокінів та інших цитокінів в сироватці крові пацієнтів. В біологічному матеріалі визначають наявність специфічних маркерів вірусних інфекцій методами ІФА, РНГА, ІХА. За дозволом Фармакологічного комітету МОЗ України виконуються специфічні фармакологічні дослідженя препаратів з антивірусною, віруліцидною, дезінфікуючою дією та наукові дослідженя щодо доклінічних випробувань лікарських препаратів та засобів зазначеної дії. Виконуються роботи по експертній оцінці для сертифікації та реєстрації в Україні засобів індивідуального захисту, презервативів (визначення бар’єрних властивостей по відношенню до збудників ВІЛ-інфекції/СНІДу, вірусних гепатитів та інших інфекційних захворювань, що передаються статевим шляхом), посуду для вірусологічного дослідження та культивування клітинних культур, приладів та обладнання для сучасних діагностичних досліджень методами імуноферментного аналізу, пристроїв очистки питної води від кишкових вірусів.

 

Допоміжне обладнання

•           BDMedimachine Для підготовки зразків тканин до аналізу на проточному цитометрі. Входить до системи визначення плоїдності популяцій

рН-метри, Для визначення рН, питомої електропровідності, проведення іон-селективних вимірів відразу 2-х параметрів паралельно, для приготування та контролю робочих розчинів, для визначення життєздатності клітин. Для визначення рН, питомої електропровідності, проведення іон-селективних вимірів відразу 2-х параметрів паралельно, для приготування та контролю робочих розчинів, для визначення життєздатності клітин.

•          фотоколориметр КФК- 2,

•          ЦЛР-1,

•          лабораторні центрифуги,

•          люмінесцентний мікроскоп (ЛОМО),

•          бінокулярні мікроскопи,

•          5 комп'ютерів

 

НАУКОВА ДІЯЛЬНІСТЬ

Виконується бюджетна фундаментальна НДР «Епігенетичні, генетичні, біохімічні та імунні фактори регуляції балансу мітозу, постмітотичної гіпертрофії та апоптозу у розвитку патології критичних станів, у тому числі раптової серцевої смерті» фундаментального напрямку із цільовим фінансуванням з бюджету (за рецензіями НАН, НАМН, головних спеціалістів МОЗ). У виконанні цієї НДР приймають участь наступні кафедри НМАПО імені П.Л.Шупика:

1.      медичної та лабораторної генетики,

2.      паліативної та хоспісної медицини,

3.      терапії і ревматології,

4.      діабетології,

5.      онкології,

6.      офтальмології,

7.      ендокринології,

8.      кардіології та функціональної діагностики,

9.      терапії і геріатрії,

10.    вірусології,

11.    патологічної та топографічної анатомії,

До виконання залучені співробітники вищенаведених кафедр, які проводили відбір тематичних хворих, забір та доставку матеріалів для дослідження. Згідно календарного плану, співробітники ЦНДЛ проводили експериментальну розробку модельного дослідження на експериментальних тваринах (150 щурів). Було проведено дослідження та апробацію запропонованих методик моделювання раптової серцевої смерті та відібрано для подальшого використання та патентування ті методики, що пройшли успішне випробування. В клініці проведено вивчення імунологічних та біохімічних маркерів у 266 тематичних хворих.

Співробітники ЦНДЛ постійно надають науково-методичну та консультативну допомогу пошукачам та аспірантам кафедр академії та інших закладів в плануванні та виконанні дисертаційних робіт, НДР. Так, проведено консультації 19 аспірантів та пошукачів (кандидатські та докторські дисертації) 17 кафедр академії по плануванню та виконанню дисертаційних робіт: медичної реабілітації та фізіотерапії, загальної та невідкладної хірургії, ортопедичної стоматології, отоларингології, хірургії, дитячих та підліткових захворювань, інфекційних хвороб, педіатрії 2, педіатрії 1, онкології, анестезіології, гастроентерології, дієтології і ендоскопії, хірургії невідкладних станів, геріатрії та терапії, медичної генетики, неврології 2. Наразі в ЦНДЛ виконується дисертація заочного аспіранта ЦНДЛ Б.Ф. Яковлева.

Крім того ЦНДЛ має договори про співробітництво з:

Ø   НДІ геронтології (відділення кардіології),

Ø   НДІ радіології, експериментальної онкології імені Р.Є. Кавецького,

Ø   Інститутом електрозварювання ім. Є.О.Патона НАН України;

Ø   Товариства з обмеженою відповідальністю «Медичний центр «Діагема»

Ø  Полтавським медичним університетом.

Ø   НТУУ КПІ;

 

У 2010 році за результатами атестації комісією МОЗ з перевірки відповідності критеріям атестації, установленим щодо робіт з проведення вимірювань (досліджень) у сфері охорони здоров’я, було надано право на проведення вимірювань (досліджень) у сфері поширення державного метрологічного нагляду в галузі охорони здоров’я відповідно до заявленої галузі атестації терміном на 5 років. Отримано Свідоцтво про атестацію №001978 від 17 січня 2011 р.

За результатами проведеної НДР у 2011 році було надруковано 8 наукових робіт.

За період існування на базі ЦНДЛ виконано 30 докторських і 40 кандидатських дисертацій. Співробітниками лабораторії опубліковано більше 800 оригінальних статей, на наукових форумах зроблено 87доповідей, в тому числі 18 за кордоном, одержано 20 авторських свідоцтв на винаходи.

 

Список виконуваних методик на

автоматичному біохімічному та ІФ аналізаторі Labline-100

 

Біохімічний аналіз (ензими, субстрати, ліпіди, електроліти, латексна та імунотурбодіметрія білків сироватки),

Іммуноферментний аналіз (при інфекційних захворюваннях, пухлинні маркери, гормони щитовидної залози та антитіла, гормони репродуктивних та ендокринних органів, імуноглобуліни, антитіла при системних та аутоімунних та захворюваннях)

Додаткова інформація: http://biotechlab-s.com/ , http://www.diaveritas.com.ua/ , http://diameb.ua/ , http://terra-med.com.ua/ , http://www.vector-best.ru/

 

М Е Т О Д И К И

які виконуються в Центральній науково-дослідній лабораторії

Національної медичної академії післядипломної освіти імені П.Л. Шупика

МОЗ України.

 

Назви величин, що вимірюються

Назви та опис об’єктів вимірювань

Діапазон вимірювань

Похибка вимірювань

Амінотрансферази

(АлАТ

АсАТ)

Сироватка крові

АсАТ

3-300 Ед/л

АлАТ

(3-300) Ед/л

АсАТ

(±2,77 %)

АлАТ

(±2,92 %)

Фермент каталаза

Сироватка крові

(10,5 - 46,5)

мкатО/л

±9 %

Перекисне окислення ліпідів

Сироватка крові

1,2-5,5

од/мл

±5 %

Малоновий диальдегід

Еритроцити крові

3,5-5,6

ммоль/л

±5 %

Сечова кислота

Сироватка крові

 0,3 - 25

г/дл

±2,5 %

Середні молекули

Сироватка крові

0,25-0,90

оп. од.

±7 %

Циркулюючі

імунні комплекси

Сироватка крові

10 – 500

оп.од.

±10 %

Осмотична резистентість

еритроцитів

Еритроцити крові

0-100 %

±5 %

          Альбумін

Сироватка,

 плазма

0                    0,2-7,0 г/дл

 

±4,69 %

            Лактат

Сироватка,

плазма

1-150 мг/дл 

±3,34 %

Кальцій

 

Сироватка,

плазма

 

0,2-20 мг/дл

±3,33 %

Холестерин загальний

Сироватка,

плазма

4-700 мг/дл

±2,91 %

      Тригліцериди

 

Сироватка,

плазма

2-1000 мг/дл

 

±3,5 %

Глюкоза

 

Сироватка,

плазма

2-400 мг/дл

±2,33 %

Креатинін

Сироватка,

плазма

 

0,05-15,0 мг/дл

±5,03 %

Фосфоліпіди

Сироватка,

плазма

 

5-1000 мг/дл

±4,23 %

Цинк

Сироватка,

плазма

 

4-2000 мкг/дл

 

±3,30 %

Протромбіновий час (ISI 1,97) та протромбіновий час S  (ISI 1,2)

Цитратна

 плазма

 

0-39 с.

±5 %

АЧТЧ

Цитратна

плазма

 

0-39 с.

±5 %

Фібриноген

Цитратна

плазма

 

100-550 мг/дл

(±5 %)

 

Агрегація              тромбоцитів

Цитратна

плазма

 

 Кількість тромбоцитів

1-500 тис/мкл (±1,5 %)

Ступінь активності агрегації тромбоцитів

0-80 %

(±1,5 %)

 

Імуноглобуліни

G

A

M

Сироватка крові

 

0,05-30,0

0,01-10,0

0,01-10,0

г/л

 

±15 %

Апоптозний

індекс

Лімфоцити крові

0-100 %

±5 %

Популяції та субпопуляції лімфоцитів

Лімфоцити крові

0-100 %

±3 %

Функціональний стан нейтрофілів

Нейтрофіли крові

0-100 %

±3 %

Клітинний цикл

Культура тканин

0-100 %

+1 %

Каріотип

Венозна кров

46, ХХ

46, ХУ

-

Присутність

ДНК

Chlamydia trachomatis

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Mycoplasma hominis

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Toxoplasma gondii

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Herpes virus simplex

типів 1/2

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність ДНК HSV VI типу

 

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

      Присутність ДНК HSV VII типу

 

 

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Cytomegalo-

virus

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

віруса гепатита В

Венозна кров,

  біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність

РНК

віруса гепатита С

Венозна кров,

 біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Treponema pallidum

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність провірусної 

ДНК HIV

Екстракти клітин,

венозна кров

 Наявність/

відсутність

-

Специфічні послідовності ДНК у різних ділянках хромосом

Венозна кров

46, ХХ

46, ХУ

-

Присутність

ДНК

Chlamydia

pneumoniae

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки,

харкотиння

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Mycoplasma

pneumoniae

 Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки,

харкотиння

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК Neisseria gonorrhoeae

Зішкряби слизової     оболонки,

сеча,сперма

Наявність/

відсутність

-

Присутність ДНК папіломавірусу людини високого онкогенного ризику

 Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Gardnerela vaginalis

Зішкряби слизової оболонки,

сеча, сперма

Наявність/

відсутність

-

Присутність

РНК

Rubella

 Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність  

ДНК HIV

Екстракти клітин,

венозна кров

 Наявність/

відсутність

-

Кількісне визначення

копій РНК HIV

Екстракти клітин,

венозна кров

Кількість копій РНК

-

Присутність

ДНК  

Trichomonas vaginalis

Зішкряби слизової     оболонки,

сеча,сперма

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

Candida albicans

Зішкряби слизової     оболонки, венозна кров,сеча,сперма

Наявність/

відсутність

-

Присутність

ДНК

HTLV 1,2

Зішкряби слизової     оболонки, венозна кров,біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Присутність ДНК Helicobacter pylori

Зішкряби слизової     оболонки, змиви

Наявність/

відсутність

-

Присутність ДНК

Ureaplasma urealyticu

Зішкряби слизової     оболонки,

сеча,сперма

 

 

Визначення генетичного     поліморфізму інтерлейкінів

 Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Визначення статі

Венозна кров,

зішкряби слизової оболонки, біоптати тканин

ХХ/ХУ

-

 Виявлення мутацій в гені, кодуючому трансмембранний регуляторний білок муковісцидозу

Венозна кров,

біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

 Виявлення мутацій в гені, кодуючому фермент фенілаланін-гідроксилазу

Венозна кров,

біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Визначення молекулярно-генетичних маркерів пухлин молочної залози

Венозна кров,

біоптати тканин

 Наявність/

відсутність

-

Визначення молекулярно-генетичних маркерів кардіальної патології

Венозна кров,

біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Проведення методу мікросателітного аналізу

Венозна кров,

біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Визначення  генетичного поліморфізму генів, що кодують ферменти детоксикації

Венозна кров,

біоптати тканин

Наявність/

відсутність

-

Визначення мутацій в гені  корецептору CCR-5

Екстракти клітин

Наявність/

відсутність

-

Визначення X - ламкої хромосоми

Венозна кров

Наявність/

відсутність

-

 

Адреса:

04112, Київ, вул. Дорогожицька 9
Центральна науково-дослідна лабораторія
НМАПО імені П.Л.Шупика
тел: /044/ 456-67-02, 205 49 47
e-mail: cnld@yandex.ru